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大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-2969 大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒
以下是天津本生關(guān)于大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明綜合指南:
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心ELISA法,通過預(yù)包被抗體捕獲樣本中的IL-3,再與生物素標(biāo)記的檢測抗體及HRP標(biāo)記的親和素形成復(fù)合物,TMB顯色后測定OD值,濃度與吸光度成正比。
二、試劑盒組成
預(yù)包被96孔板
凍干標(biāo)準(zhǔn)品(需用1ml蒸餾水復(fù)溶)
生物素標(biāo)記抗體(100×濃縮)
HRP標(biāo)記親和素(100×濃縮)
洗滌緩沖液(25×濃縮)
TMB顯色液及終止液
三、樣本處理
血清/血漿?:采集后1000×g離心10分鐘,避免溶血或脂血
組織勻漿?:用生理鹽水勻漿后離心取上清
保存?:短期存于2-8℃(48小時(shí)內(nèi)),長期需分裝凍存于-70℃,避免反復(fù)凍融
四、實(shí)驗(yàn)步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說明書梯度稀釋(示例:4000→2000→1000 pg/mL等比稀釋)
加樣?:每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育120分鐘
洗滌?:用1×洗滌液洗板4-6次,拍干
加檢測抗體?:加入生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘
加酶結(jié)合物?:加入HRP標(biāo)記親和素,37℃孵育30分鐘
顯色?:加入TMB避光顯色15分鐘,終止后450nm讀數(shù)
五、注意事項(xiàng)
不同批次試劑不可混用,使用前所有組分需平衡至室溫
顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制,終止后10分鐘內(nèi)完成讀數(shù)
避免底物接觸金屬器械,操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備
若樣本濃度超出范圍,需用稀釋液適當(dāng)稀釋后重測
六、數(shù)據(jù)計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過擬合方程計(jì)算樣本濃度。
注:以上資料僅供參考,如需更詳細(xì)參數(shù)(如檢測范圍、靈敏度等),建議查閱試劑盒配套說明書或聯(lián)系供應(yīng)商獲取。
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